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鸭甲肝病毒1型和3型HRM检测方法的建立

鸭甲肝病毒1型和3型HRM检测方法的建立

作     者:董嘉文 李林林 张俊勤 黄允真 孙敏华 DONG Jiawen;LI Linlin

作者机构:广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽药与诊断学科群广东科学观测实验站广东广州510640 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525000 

基  金:科技创新战略专项资金(高水平农科院建设)(202110TD R2020PY⁃JC001 R2020PY⁃JX014 R2020QD⁃049 R2018QD⁃093) 江门市科技计划项目(DZX20192520301 2020030103310009038) 梅州市科技计划项目(2020A0104004) 

出 版 物:《广东畜牧兽医科技》 (Guangdong Journal of Animal and Veterinary Science)

年 卷 期:2021年第46卷第3期

页      码:88-91,100页

摘      要:本研究根据鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)和3型(DHAV-3)的5′UTR基因的保守区域,设计了1对特异性的引物,扩增目的片段大小约为199 bp。通过优化反应条件,建立了基于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的鸭甲肝病毒1型和鸭甲肝病毒3型的鉴别检测方法。特异性试验结果表明,该方法能特异性地检测出DHAV-1和DHAV-3,检测其它常见鸭源病毒不能形成特异性的熔解峰;敏感性和重复性试验表明,对p-DHAV-1和p-DHAV-3阳性质粒的最低检测限分别为220 copies和28 copies,对不同批次的样品扩增效果良好,具有良好的批内和批间重复性。采用该方法检测临床样品,与传统的二重PCR方法比较,符合率为100%。该方法为DHAV-1和DHAV-3的临床疑似病例的鉴别检测、快速诊断以及分子流行病学调查等提供了技术支撑。

主 题 词:鸭甲肝病毒1型 鸭甲肝病毒3型 HRM 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号:203103579...

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