建兰花色调控关键基因的克隆与表达

作     者：李文建 王澎 王观龙 谢朝晖 朱涛 王莲哲 LI Wen-jian;WANG Peng;WANG Guan-long;XIE Zhao-hui;ZHU Tao;WANG Lian-zhe

作者机构：河南城建学院生命科学与工程学院河南平顶山467036 

基　　金：河南省科技攻关计划项目(182102110093 172102110110) 

出 版 物：《河南城建学院学报》 (Journal of Henan University of Urban Construction)

年 卷 期：2021年第30卷第2期

页      码：73-77,92页

摘      要：对建兰花色形成的关键调控基因(CHS)编码区片段克隆至pET28a质粒,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)。SDS-PAGE检测表达产物,针对IPTG浓度、温度与时间等因素,优化其最佳诱导表达条件。结果显示:(1)总RNA提取质量高,经反转录成cDNA,设计引物通过PCR扩增,琼脂糖电泳显示片段为1200 bp;(2)对转化子进行菌落PCR与质粒双酶切鉴定,片段大小均为1200 bp与预计相符,经测序获得片段插入方向正确,未发生突变,可用于蛋白诱导表达;(3)诱导表达优化显示,温度为37℃、IPTG浓度1 mM及诱导时间6 h是重组子(pET28-CeCHS1)在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达的最佳条件。

主 题 词：建兰 花色调控 CeCHS1基因 克隆与表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.14140/j.cnki.hncjxb.2021.02.013

馆 藏 号：203103678...