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重组酶介导等温核酸扩增技术检测伯氏疏螺旋体方法的建立

重组酶介导等温核酸扩增技术检测伯氏疏螺旋体方法的建立

作     者:马晓菁 谢彩云 刘丽娅 叶锋 谷文喜 钟旗 易新萍 MA Xiao-jing;XIE Cai-yun;LIU Li-ya;YE Feng;GU Wen-xi;ZHONG Qi;YI Xin-ping

作者机构:新疆畜牧科学院兽医研究所新疆乌鲁木齐830011 

基  金:国家重点研发计划项目(2017YFC1200500) 

出 版 物:《中国兽医杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Medicine)

年 卷 期:2021年第57卷第3期

页      码:77-79页

摘      要:本试验采用重组酶介导等温核酸扩增(RAA)技术建立伯氏疏螺旋体核酸的检测方法。根据伯氏疏螺旋体16S rRNA基因保守序列设计并合成特异性RAA引物,采用重组酶介导扩增技术电泳法,以10倍系列稀释1 ng/μL伯氏疏螺旋体B31基因组DNA为模板进行RAA,测定该方法的敏感性。通过对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体基因组DNA扩增验证该方法的特异性。结果显示,该方法对伯氏疏螺旋体标准株的B31基因组DNA检测限约为100 fg/μL,对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体均无扩增,具有良好的特异性。RAA具有特异性高、检测快速、灵敏等优点,本研究建立的伯氏疏螺旋体RAA检测方法,为伯氏疏螺旋体临床样本的快速诊断提供依据。

主 题 词:重组酶介导扩增 伯氏疏螺旋体 检测 莱姆病 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号:203103926...

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