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抗前列腺癌多肽融合蛋白在大肠杆菌中的原核表达

抗前列腺癌多肽融合蛋白在大肠杆菌中的原核表达

作     者:李斌 郝晓柯 李立文 苏明权 姜南艳 LI Bin;HAO Xiao-Ke;LI Li-Wen;SU Ming-Quan;JIANG Nan-yan

作者机构:第四军医大学西京医院检验科陕西西安710033 第四军医大学西京医院全军骨科研究所陕西西安710033 

出 版 物:《第四军医大学学报》 (Journal of the Fourth Military Medical University)

年 卷 期:2005年第26卷第9期

页      码:796-798页

摘      要:目的:探讨抗前列腺癌多肽融合蛋白在大肠杆菌中的原核表达,为抗前列腺癌新药的研究奠定基础.方法:通过BH3,K237,DG2结构域和能被PSA特异性水解的短肽序列设计多肽药物的氨基酸序列,并依据大肠杆菌的偏爱密码子反翻译成基因序列.分段合成寡聚脱氧核糖核酸,经磷酸化、退火后,先后克隆至表达载体pGEX4T2的BamHI和EcoRI之间.将经双酶切鉴定获得的阳性重组子进行DNA测序.用IPTG诱导重组菌株表达并进行SDS PAGE分析.结果:pGEX4T2APP216酶切鉴定可见约216bp电泳条带,与设计长度相符.测序结果证实pGEX4T2APP216的基因序列与设计完全一致.SDS PAGE分析表明该基因在原核细胞中获得高效融合表达,所得到蛋白分子质量与预测相符.融合蛋白表达量约占菌体总蛋白的30%.结论:通过抗前列腺癌多肽序列在大肠杆菌中的高效表达,为前列腺癌的治疗提供新的思路和方法.

主 题 词:多肽药物 前列腺癌 设计 基因表达 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D O I:10.3321/j.issn:1000-2790.2005.09.008

馆 藏 号:203103935...

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