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人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65重组抗原酶联免疫吸附法的建立与两种方法的比较分析

人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65重组抗原酶联免疫吸附法的建立与两种方法的比较分析

作     者:类延花 王明丽 LEI Yan-hua;WANG Ming-li

作者机构:安徽医科大学微生物学教研室合肥230032 

基  金:教育部科学技术重点项目(01052) 安徽省生物医药重大科技专项项目(01303003) 

出 版 物:《中华检验医学杂志》 (Chinese Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期:2005年第28卷第6期

页      码:599-601页

摘      要:目的用我们研制的一种新人巨细胞病毒(HCMV)重组被膜磷蛋白pp65为抗原,建立快速、简便和特异的检测HCMVIgM的间接酶联免疫吸附法(RECELISA)。方法用自行设计、表达的新的HCMVpp65重组抗原,建立RECELISA,并检测100份临床疑似为HCMV感染者血清中HCMVIgM,同时与全病毒为抗原的间接ELISA法(简称全病毒ELISA法)和美国BioCheck试剂盒(简称BioCheck法)检测结果进行比较。结果RECELISA法重组抗原最适量为3.5μg/孔,HRP标记二抗为1∶800,血清稀释度为1∶100;稳定性试验阳性变异系数(CV)为9.5%,重复性试验平均CV值:批内CV4.5%,批间CV9.6%。RECELISA法、全病毒ELISA法和BioCheck法检测HCMVIgM的阳性率分别为44%、50%和45%;RECELISA法的敏感性为95.6%,其特异性(98.2%)高于全病毒ELISA法(90.9%);正确指数为92.8%,与BioCheck法一致性为97.0%。结论用pp65重组抗原建立的RECELISA法具有高度特异性与敏感性,且操作简单、快速,重复性好;与全病毒抗原相比,重组抗原可规模化、标准化生产,且更安全、经济,具有良好的临床应用前景。

主 题 词:人巨细胞病毒 重组抗原 被膜磷蛋白 pp65 比较分析 间接酶联免疫吸附法 间接ELISA法 变异系数(CV) HCMV 临床应用前景 血清稀释度 稳定性试验 重复性试验 全病毒抗原 标准化生产 自行设计 检测结果 正确指数 IgM 敏感性 

学科分类:1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/j:issn:1009-9158.2005.06.013

馆 藏 号:203103939...

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