抗大肠杆菌的新型溶菌酶的设计及表征

作     者：吴瑕 孙润聪 刘志强 查健 龚国利 WU Xia;SUN Run-cong;LIU Zhi-qiang;ZHA Jian;GONG Guo-li

作者机构：陕西科技大学食品与生物工程学院陕西西安710021 

基　　金：国家自然科学基金项目(31900114) 陕西省科技厅重点研发计划项目(2021NY-124) 陕西省科技厅自然科学基金项目(2020JQ-702) 

出 版 物：《陕西科技大学学报》 (Journal of Shaanxi University of Science & Technology)

年 卷 期：2021年第39卷第4期

页      码：45-50页

摘      要：大肠杆菌是常见致病菌,对多种抗生素已产生耐药性,因此,需要开发新型抗菌剂用于预防及治疗大肠杆菌感染.然而,大肠杆菌独特的细胞外膜结构可阻止多种抗菌剂进入菌体发挥作用.为提高抗菌剂的跨膜杀菌性能,选取T4噬菌体编码的T4溶菌酶,在其N端融合不同种类的细胞穿透肽,并对融合蛋白进行重组表达.细胞壁降解实验及碘化丙啶染色实验表明,融合了细胞穿透肽的T4溶菌酶保留了其催化活性,同时具有穿膜特性.杀菌实验证明,阳离子型细胞穿透肽Pc及两亲型细胞穿透肽Pa与T4溶菌酶的融合可极大提高酶对大肠杆菌的跨膜杀菌活性,且低浓度EDTA的辅助可进一步提高融合酶的杀菌效果.其中,对于初始菌浓为10^(6) CFU/mL的Top10菌株,联合使用0.35μg/mL的Pa-T4L融合酶与0.3 mM EDTA,可在室温条件下于3 h内杀灭94%的菌体.研究结果可为针对革兰氏阴性菌的抗菌剂设计提供新思路.

主 题 词：大肠杆菌 细胞外膜 细胞穿透肽 溶菌酶 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 071005[071005] 10[医学] 

D　O　I：10.19481/j.cnki.issn2096-398x.2021.04.007

馆 藏 号：203104148...