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一种汉滩病毒和汉城病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

一种汉滩病毒和汉城病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者:刘师文 熊英 施勇 李健雄 王倩 龚甜 LIU Shi-wen;XIONG Ying;SHI Yong;LI Jian-xiong;WANG Qian;GONG Tian

作者机构:江西省疾病预防控制中心南昌330029 

基  金:江西省科技计划项目重点研发计划(No.20202BBGL73052) 

出 版 物:《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期:2021年第37卷第6期

页      码:478-483页

摘      要:目的建立一种汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)和汉城病毒(Seoul virus,SEOV)双重实时定量荧光RT-PCR检测方法。方法根据HTNV和SEOV S基因设计引物和探针、优化反应条件,建立2种汉坦病毒的双重实时荧光定量RT-PCR方法。以甲型流感病毒、登革热病毒、新布尼亚病毒、寨卡病毒、新冠病毒阳性核酸为模板验证方法的特异性,将建立的方法与巢氏RT-PCR比较,确定方法对临床样本的适用性。结果建立了一种HTNV和SEOV双重实时定量荧光RT-PCR检测方法,该方法对2种型别病毒的最低检测限均为10 copies/μL,不同浓度标准品Ct值批内和批间差异均小于2%。与登革热病毒、新布尼亚病毒、寨卡病毒、新型冠状病毒、甲型流感病毒均无交叉反应。对10份肾综合征出血热急性期血清样本进行检测,结果9份为HTNV、1份为SEOV,与巢式RT-PCR方法结果一致。结论建立的双重实时荧光定量RT-PCR方法可以快速对HTNV和SEOV进行分型和定量检测,适用于肾综合征出血热临床早期诊断。

主 题 词:汉滩病毒 汉城病毒 双重实时荧光定量RT-PCR 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1002-2694.2021.00.067

馆 藏 号:203104152...

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