多重PCR联合毛细管电泳技术检测碳青霉烯酶基因

作     者：孙宁 于娟 余柏增 陈勇 曹进 黄红娟 王卫萍 张立平 李晓军 SUN Ning;YU Juan;YU Baizeng;CHEN Yong;CAO Jin;HUANG Hongjuan;WANG Weiping;ZHANG Liping;LI Xiaojun

作者机构：东部战区总医院基础医学实验室南京210002 南京市溧水区人民医院检验科南京211200 南京大学生命分析化学国家重点实验室南京210002 

基　　金：国家临床重点专科军队建设项目(2014ZDZK003) 国家自然科学基金(81601857) 南京市卫生健康委项目(YKK18214、YKK18216) 

出 版 物：《临床检验杂志》 (Chinese Journal of Clinical Laboratory Science)

年 卷 期：2021年第39卷第5期

页      码：340-345页

摘      要：目的建立并评价多重PCR联合毛细管电泳技术(mPCR-CE)同时检测碳青霉烯酶基因bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(OXA-48)和bla_(VIM)的方法。方法设计特异性引物,建立多重PCR扩增体系,利用毛细管电泳检测扩增产物。以携带bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(OXA-48)和bla_(VIM)的细菌作为阳性对照菌株,以携带其他β-内酰胺酶基因细菌作为阴性对照,用于mPCR-CE的灵敏度、特异性评价。收集68株碳青霉烯耐药菌株,利用mPCR-CE方法进行检测,并与PCR扩增后测序结果比较。结果mPCR-CE检测携带bla_(KPC)、bla_(NDM)和bla_(VIM)细菌最低检测限均为1.5×10^(2) CFU/mL,检测携带bla_(OXA-48)细菌为1.5×10^(3) CFU/mL,并且与携带其他β-内酰胺酶基因的细菌无交叉反应。经mPCR-CE检测,68株临床分离菌株中37株携带bla_(KPC),8株携带bla_(NDM),未检测到携带bla_(OXA-48)和bla_(VIM)的菌株,结果与PCR扩增后测序结果完全一致。结论mPCR-CE可用于临床分离菌株的主要碳青霉烯酶基因检测。

主 题 词：碳青霉烯酶基因 多重PCR 毛细管电泳 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D　O　I：10.13602/j.cnki.jcls.2021.05.05

馆 藏 号：203104161...