重组酶聚合酶等温扩增快速检测肺炎支原体方法的建立和初步应用

作     者：杨永强 龙炫辉 魏涛 邓宁波 桑晔 唐文志 YANG Yong-qiang;LONG Xuan-hui;WEI Tao;DENG Ning-bo;SANG Ye;TANG Wen-zhi

作者机构：广东省中医院珠海医院检验科广东珠海519005 

基　　金：广东省珠海市科技计划项目(20181117E030063) 广东省医学科学技术研究基金项目(A2018522) 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2021年第21卷第11期

页      码：2169-2173,2178页

摘      要：目的:建立基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)技术快速检测肺炎支原体的方法。方法:本研究以肺炎支原体编码P1黏附蛋白为靶基因,利用Primer Premier 5软件进行引物、探针的设计,最终筛选出最佳引物。同时设计相应的实时荧光定量PCR(RT-PCR)引物用于后续的验证试验。对反应体系试剂比例、反应时间、反应温度、引物探针浓度进行确定。肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、肺炎克雷伯菌、肺炎双球菌、大肠杆菌和链球菌作为对照评估RPA检测肺炎支原体的特异性及敏感度。结果:RPA快速检测肺炎支原体方法仅需14 min,检测灵敏度达200 copies/mL;6种非肺炎支原体均不能扩增,特异性较高。结论:本研究建立了肺炎支原体的RPA快速检测方法,具有迅速、简便、经济等优势,为肺炎支原体的快速检测提供一个新的有利工具。

主 题 词：重组酶聚合酶扩增技术 肺炎支原体 反应体系 建立 应用 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.13241/j.cnki.pmb.2021.11.037

馆 藏 号：203104172...