微小RNA-7同步干预表皮生长因子受体下游双通路抑制胶质瘤生长

作     者：杨彬 刘振林 姜忠敏 苏治国 王骏飞 李罡 于士柱 刘晓智 Yang Bin;Liu Zhenlin;Su Zhiguo;Wang Jun-fei;Li Gang

作者机构：天津市第五中心医院神经外科300450 天津市第五中心医院病理科300450 天津市神经病学研究所 

基　　金：国家973计划子项目(2010CB529405) 国家自然科学基金资助项目(81000901) 天津市科技创新体系及条件平台建设计划重大项目(10SYSYJC28800) 天津市滨海新区医药卫生科研基金资助项目(2012BWKZ001) 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2014年第31卷第1期

页      码：98-101页

摘      要：目的 寻找微小RNA（miR）-7在表皮生长因子受体（EGFR）通路下游的作用靶点,探讨其抑制胶质瘤生长的内在机制.方法 瞬时转染人CHG5胶质瘤细胞miR-7寡核苷酸序列,实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-7水平；噻唑蓝（MTT）比色法绘制细胞生长曲线,Transwell小室实验检测瘤细胞迁移能力,软琼脂克隆形成实验检测瘤细胞致瘤潜能；Western blot方法检测磷酸肌醇3激酶（PI3K）、Raf-1、细胞周期素（Cyclin） D1、磷酸化苏氨酸激酶（p-AKT）和磷酸化丝裂原细胞外激酶1/2（p-MEK1/2）的蛋白表达；利用TargetScan和Saner软件共同分析预测miR-7的潜在靶点；荧光素酶实验验证miR-7与PI3K和Raf-1间的靶关系.结果 与脂质体组和无义序列组比较,miR-7组瘤细胞增殖速度减慢,瘤细胞迁移力降低,肿瘤克隆能力减弱（P＜0.05）；Western blot结果显示EGFR下游通路成员表达均有不同程度下降；荧光素酶实验证实PI3K和Raf-1均是miR-7的直接作用靶点.结论 miR-7通过同时调控EGFR下游PI3K/ATK和Raf/MEK/ERK两条通路发挥肿瘤生长抑制作用.

主 题 词：胶质瘤 表皮生长因子受体 微小RNA 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2014.01.033

馆 藏 号：203104282...