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栽培大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)全长cDNA的克隆及原核表达

栽培大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)全长cDNA的克隆及原核表达

作     者:崔喜艳 董雅致 刘晓庆 张治安 CUI Xi-yan;DONG Ya-zhi;LIU Xiao-qing;ZHANG Zhi-an

作者机构:吉林农业大学生命科学学院吉林长春130118 吉林农业大学农学院吉林长春130118 

基  金:国家自然科学基金(31171459) 吉林省自然科学基金(201215178) 

出 版 物:《中国油料作物学报》 (Chinese Journal of Oil Crop Sciences)

年 卷 期:2014年第36卷第3期

页      码:329-333页

摘      要:根据NCBI中发表的大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)序列(AF303939-1)设计特异引物,以吉农13大豆为实验材料,采用Trizol法提取叶片总RNA,通过RT-PCR克隆大豆rbcS的cDNA。将该基因与原核表达载体pET-30a(+)连接,转化大肠杆菌*** BL21感受态细胞,双酶切鉴定后筛选阳性克隆,测序结果显示:rbcS全长696bp,其中开放阅读框为537bp,编码178个氨基酸;选择含大豆rbcS cDNA阳性克隆菌液IPTG诱导,经SDSPAGE分析,诱导表达出分子量为29.1kDa的融合蛋白,表达产物大小与预计理论值相符。诱导7h蛋白表达量最高,为64.15%。

主 题 词:栽培大豆 rbcS 基因克隆 原核表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.7505/j.issn.1007-9084.2014.03.006

馆 藏 号:203104303...

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