猪星状病毒1型衣壳蛋白的截短表达及多克隆抗体的制备

作     者：王蔚怡 张文超 郑瑞程 刘欢 黄伟坚 WANG Wei-yi;ZHANG Wen-chao;ZHENG Rui-cheng;LIU Huan;HUANG Wei-jian

作者机构：广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 广西中医药大学第一附属医院广西南宁530024 

基　　金：国家自然科学基金地区基金(31760735) 广西研究生教育创新计划项目(YCBZ2019004) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2021年第43卷第4期

页      码：431-434页

摘      要：为制备猪星状病毒1型(PAstV1)Cap蛋白高变区特异性多克隆抗体,本研究根据PAstV-GX1株Cap蛋白Cs(aa420~aa669)基因序列设计引物,PCR扩增该片段(Cs)后克隆于pET-32a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET32a-Cs,将其转化E. coli BL21感受态细胞,经终浓度1 mmol/L的IPTG在37℃诱导6 h后经SDS-PAGE检测表达产物,结果显示在大约47 ku处出现目的蛋白,且该蛋白以可溶性形式表达。将重组Cs蛋白经Ni柱纯化后乳化,按100μg/只免疫6周龄BALB/c小鼠,三免后5 d采血分离血清,经western blot和间接免疫荧光检测结果显示,获得的Cap蛋白高变区多克隆抗体可特异性识别PAstV-GX1感染的PK15细胞表达的病毒蛋白。本研究首次制备的PAstV Cap蛋白高变区纯化蛋白及其多克隆抗体为后续PAstV病原学研究奠定了基础。

主 题 词：猪星状病毒 衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.202004015

馆 藏 号：203104422...