反刍动物埃立克体荧光定量PCR检测技术的建立和应用

作     者：王素华 王忠才 黄凌哲 莫虹斐 吴绍强 吕继洲 赵治国 帅江冰 WANG Suhua;WANG Zhongcai;HUANG Lingzhe;MO Hongfei;WU Shaoqiang;LÜJizhou;ZHAO Zhiguo;SHUAI Jiangbing

作者机构：温州海关综合技术服务中心温州325027 杭州海关技术中心杭州310012 中国检验检疫科学研究院动物检疫所北京100029 呼和浩特海关技术中心呼和浩特010020 

基　　金：浙江省自然科学基金项目(LGN19C180001) 海关总署科技计划项目(2020HK156) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2021年第52卷第7期

页      码：1975-1982页

摘      要：为快速、准确地检测反刍动物埃立克体,本研究以反刍动物埃立克体pCS20为靶基因设计特异性引物和探针,建立了TaqMan和Eva Green荧光定量PCR方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与OIE推荐的套式PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示,本方法特异性强,与牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、犬埃立克体、牛埃立克体、马埃立克体和立氏埃立克体无交叉反应;TaqMan和Eva Green荧光定量PCR对pCS20质粒标准品的最低检测限分别为17.4拷贝·μL^(-1)和1.74拷贝·μL^(-1),标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5%。对420只钝眼蜱样本的检测显示,TaqMan和Eva Green荧光定量PCR的检出率分别为25.48%和29.29%,与套式PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为反刍动物埃立克体的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。

主 题 词：反刍动物埃立克体 pCS20基因 TaqMan荧光定量PCR Eva Green荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.11843/j.issn.0366-6964.07.019

馆 藏 号：203104481...