鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB与靶基因的作用机理分析

作     者：潘永 杨阳 段世宇 杨琦 PAN Yong;YANG Yang;DUAN Shiyu;YANG Qi

作者机构：贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州大学动物疫病研究所贵州贵阳550025 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室贵州贵阳550025 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31760740,31602065) 贵州省科技厅联合资金项目贵州大学2017年度学术新苗培养及创新探索专项资助项目(黔科合LH字7263,黔科合平台人才5788) 贵州省科技厅基金资助项目(黔科合基础1047) 贵州省研究生教育创新计划资助项目(GZZ2017002) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2021年第41卷第7期

页      码：1321-1327,1334页

摘      要：为深入了解鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB与靶基因的结合位点,在此前报道的鼠伤寒沙门菌GcvB调控基因基础上,本试验首先通过对部分显著调控基因进行荧光定量PCR引物的设计与合成,然后利用无痕基因重组技术分别构建鼠伤寒沙门菌gcvB基因R1、R2和R3功能基序缺失菌株,最后通过荧光定量PCR技术检测各基因在鼠伤寒沙门菌野生型菌株、gcvB基因缺失株、gcvB R1基因缺失株、gcvB R2基因缺失株和gcvB R3基因缺失株中对数期转录水平变化。PCR扩增及测序结果显示,gcvB基因R1、R2和R3基序已被分别敲除且未留下冗余序列。荧光定量PCR检测结果显示,fhuA、aphA、STM2714、STM0298和STM1827基因在gcvB、gcvB R1、gcvB R2或gcvB R3单敲除时转录水平均显著下调,STM0276、exbD和sodA基因在gcvB、gcvB R1或gcvB R2单敲除时转录水平均显著下调,trpE和yifK基因则在gcvB或gcvB R3单敲除时转录水平均显著上调。以上结果表明,GcvB正调控fhuA、aphA、STM2714、STM0298和STM1827基因可能与R1、R2或R3基序相关,正调控STM0276、exbD和sodA基因可能与R1或R2基序相关,负调控trpE和yifK基因与R3基序有关。

主 题 词：鼠伤寒沙门菌 小RNA 无痕基因重组 荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 1002[医学-临床医学类] 09[农学] 0906[农学-水产类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.07.15

馆 藏 号：203104668...