利用Tn5型转座突变系统筛选高产阿维菌素菌株

作     者：冯宝琪 冯娇 张苗 刘洋 曹睿 尹涵之 齐凤仙 李子龙 尹守亮 FENG Bao-qi;FENG Jiao;ZHANG Miao;LIU Yang;CAO Rui;YIN Han-zhi;QI Feng-xian;LI Zi-long;YIN Shou-liang

作者机构：华北理工大学基础医学院唐山063210 华北理工大学生命科学学院唐山063210 中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室北京100101 

基　　金：河北省科技计划农业关键共性技术攻关专项(18222916) 河北省自然科学基金(C2019209399)资助项目 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2021年第41卷第7期

页      码：32-41页

摘      要：目的:转座突变技术是发现新功能基因和获得高产天然产物菌株的一种有效策略。通过理性设计和构建Tn5型转座突变系统,并将其应用于阿维链霉菌,筛选高产阿维菌素的工程菌株。方法:在转座突变载体pUCTN转座插入片段的上游和下游分别引入链霉菌常用的强启动子kasOp*和P21,强化插入位置上游和下游基因的转录表达;在插入片段两端分别添加双向转录终止子T1和T2,有效终止插入序列两端靶基因的转录,引入强启动子和终止子的目的在于增强对转座突变株生理代谢活动的扰动。结果:通过优化供体菌和受体菌的比例,转座效率显著提高。随机选择500株转座突变株进行发酵和阿维菌素产量测试,筛选到3株突变株的阿维菌素产量明显高于出发菌株产量的50%以上。结论:Tn5转座突变系统为研究阿维链霉菌的基因功能和生理代谢提供了有效的分子遗传工具。

主 题 词：阿维链霉菌 阿维菌素 Tn5转座突变 分子遗传工具 

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13523/j.cb.2102033

馆 藏 号：203104682...