利用单碱基编辑系统定点编辑哈萨克羊MSTN基因的研究

作     者：姚旭东 蒙亚琦 任秀美奥 郭延华 唐红 张译元 王立民 周平 YAO Xudong;MENG Yaqi;REN Xiumeiao;GUO Yanhua;TANG Hong;ZHANG Yiyuan;WANG Limin;ZHOU Ping

作者机构：石河子大学动物科技学院石河子832000 新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室石河子832000 

基　　金：转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08008001) 兵团“强青”科技创新骨干人才计划项目(2021CB032) 国家自然科学基金(31660341) 省部共建绵羊遗传改良与健康养殖重点实验室(2013KLS05) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2021年第52卷第8期

页      码：2162-2170页

摘      要：肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)可负调控骨骼肌的发育。本研究利用胞嘧啶碱基编辑器(cytidine base editor,CBE)在哈萨克羊MSTN基因编码区提前引入终止密码子,以期达到敲除MSTN基因的目的。共设计2条靶向哈萨克羊MSTN基因不同外显子的sgRNAs,分别连接至pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin质粒,并与pCMV-AncBE4 max-P2A-GFP质粒共转染哈萨克羊胎儿成纤维细胞,经CruiserTM酶酶切检测、Sanger测序和TA克隆分析。结果显示,成功筛选出可以在哈萨克羊MSTN基因外显子提前引入终止密码子的2条sgRNAs,其中STOPsg-1靶位点编辑效率为26.7%,STOPsg-2靶位点的编辑效率为6.7%。本研究成功运用CBE(AncBE4 max)技术在哈萨克羊胎儿成纤维细胞MSTN基因编码区实现定点编辑,为培育精确编辑MSTN基因的哈萨克羊奠定基础。

主 题 词：哈萨克羊 单碱基编辑 MSTN 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 090501[090501] 

核心收录：

D　O　I：10.11843/j.issn.0366-6964.2021.08.009

馆 藏 号：203104728...