可视化跨越式滚环扩增技术检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

作     者：苑宁 张蕴哲 张海娟 于泽 卢鑫 张伟 YUAN Ning;ZHANG Yunzhe;ZHANG Haijuan;YU Ze;LU Xin;ZHANG Wei

作者机构：河北农业大学理工学院河北沧州061100 河北农业大学食品科技学院河北保定071000 河北农业大学生命科学学院河北保定071000 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(31371772) 河北省自然科学基金重点项目(C2019204342) 河北省重点研究开发项目(18275501D) 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2021年第42卷第16期

页      码：239-245页

摘      要：建立一种新型的单核细胞增生李斯特氏菌检测方法,即通过可视化跨越式滚环等温扩增(saltatory rolling circle amplification,SRCA)技术检测单核细胞增生李斯特氏菌。根据单核细胞增生李斯特氏菌hlyA基因序列设计引物,进行特异性验证,对灵敏度和人工污染样品的检出限进行测定。通过检测70种实际食品样品对SRCA方法的敏感性、特异性和符合率进行评价。结果表明:所有单核细胞增生李斯特氏菌呈阳性结果,非单核细胞增生李斯特氏菌呈阴性结果,说明该方法特异性良好。SRCA方法的灵敏度为8.9×10^(0)fg/μL,是传统聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法的1000倍,检出限为2.8×10^(0)CFU/g,是传统PCR方法的1/1000。在实际样品的检测中,SRCA方法与GB 4789.30—2016《食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌》方法进行比较,其敏感性、特异性和符合率分别为100%、97.01%和97.14%。可视化SRCA技术具有操作简便、设备简单、特异性强、灵敏度高、检出限低、检测成本低等优点,适合在基层单位和中小型食品企业中推广应用。

主 题 词：跨越式滚环等温扩增技术 单核细胞增生李斯特氏菌 hlyA基因 检测 可视化 

学科分类：0832[0832] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 08[工学] 083201[083201] 

核心收录：

D　O　I：10.7506/spkx1002-6630-20200130-290

馆 藏 号：203104768...