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人源温和气单胞菌溶血素基因的克隆与表达

人源温和气单胞菌溶血素基因的克隆与表达

作     者:武斌 于宙亮 于珊 水小溪 宋杰 赵宝华 WU Bin;YU Zhou-liang;YU Shan;SHUI Xiao-xi;SONG Jie;ZHAO Bao-hua

作者机构:河北师范大学生命科学学院河北石家庄050016 

基  金:河北省自然科学基金(C2007000263) 

出 版 物:《河北师范大学学报(自然科学版)》 (Journal of Hebei Normal University:Natural Science)

年 卷 期:2008年第32卷第2期

页      码:239-242页

摘      要:根据GenBank报道的人源温和气单胞菌溶血素(hly)基因序列设计引物,经PCR扩增,得到大小约为1470 bp的阳性产物.利用BamHⅠ,HindⅢ位点将hly基因片段克隆到pMD19-T载体,构建得到重组质粒pWT-hly,并比较所克隆基因序列的同源性.然后将该基因克隆到原核表达载体pET-28a,构建原核重组表达质粒pWET-hly,转化BL21(DE3)并进行SDS-PAGE分析.结果表明:克隆的hly基因与GenBank报道的溶血素基因同源性为96.19%;重组菌株经IPTG诱导后,hly基因得到了高效表达.

主 题 词:温和气单胞菌 溶血素基因 克隆 表达 

学科分类:08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.13763/j.cnki.jhebnu.nse.2008.02.013

馆 藏 号:203104829...

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