红霉素合成蛋白基因的克隆和高表达

作     者：于海楠 汪志军 梁晶丹 Yu Hainan;Wang Zhijun;Liang Jingdan

作者机构：上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200030 

基　　金：国家重点研发计划项目(2019YFA0905400)资助 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2021年第40卷第3期

页      码：1356-1360页

摘      要：文献报道红霉素合成蛋白DEBS2(6-脱氧红霉内酯B合酶)(374 kD)基因在大肠杆菌(Escherichia coli)中异源表达量比较低,难以开展后续蛋白纯化和结构等研究。为获得该大蛋白基因的异源高表达,本研究通过PCR的方法,对编码红霉素合成蛋白DEBS2的基因起始5 端设计了起始密码子之后的十一个简并密码子序列,随机筛选获得在表达宿主BL21(DE3)中高表达的简并序列质粒,质粒命名为DEBS2-17。结果表明:mRNA的起始二级结构影响200 kD以上的蛋白质表达水平。本研究为开展红霉素合成蛋白的结构及生化研究提供理论基础,同时对表达分子量200 kD以上蛋白具有一定借鉴意义。

主 题 词：红霉素 蛋白表达 简并序列 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13417/j.gab.040.001356

馆 藏 号：203104853...