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新城疫强毒特异性反转录荧光定量PCR检测方法的建立与应用

新城疫强毒特异性反转录荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作     者:徐敏丽 于江 逯璐 张玉玉 任素芳 陈智 孙文博 郭立辉 吴家强 张琳 Xu Minli;Yu Jiang;Lu Lu;Zhang Yuyu;Ren Sufang;Chen Zhi;Sun Wenbo;Guo Lihui;Wu Jiaqiang;Zhang Lin

作者机构:山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100 山东管理学院新兴业态发展研究所山东济南250357 

基  金:泰山学者特聘专家工程经费(ts201511069) 山东省农业科学院农业科技创新工程项目“主要畜禽重要疫病防控关键技术与产品创制”(CXGC2021A12) 

出 版 物:《山东农业科学》 (Shandong Agricultural Sciences)

年 卷 期:2021年第53卷第8期

页      码:112-118页

摘      要:为建立一种敏感性高、特异性强、成本更低的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)特异性反转录荧光定量PCR(reverse transcription fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测方法,基于对所有已知NDVF基因序列特征的分析,设计了一对强毒特异性引物,以体外转录制备的RNA标准品为阳性模板,构建了标准曲线,并对该方法的敏感性、特异性和准确性进行了验证。结果表明,基于SYBRGreenⅠ嵌合荧光技术建立的检测方法能够特异性扩增NDV强毒,最低可检测1拷贝/μL的RNA,用于临床毒株的检测结果与序列测定一致,可作为适合大规模监测NDV强毒的方法和工具。

主 题 词:新城疫病毒 强毒 反转录荧光定量PCR 监测 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.14083/j.issn.1001-4942.2021.08.020

馆 藏 号:203104855...

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