基于重组酶介导核酸等温扩增技术的日本血吸虫特异性基因片段核酸试纸条检测方法的建立

作     者：叶钰滢 赵松 刘燕红 张键锋 熊春蓉 应清界 杨坤 YE Yu-Ying;ZHAO Song;LIU Yan-Hong;ZHANG Jian-Feng;XIONG Chun-Rong;YING Qing-Jie;YANG Kun

作者机构：国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064 江苏省奇天生物科技有限公司 

基　　金：江苏省国际科技合作项目(BZ2020003) 江苏省重点研发计划(社会发展)面上项目(BE2019755) 江苏省省属公益院所能力提升项目(BM2018020-3) 

出 版 物：《中国血吸虫病防治杂志》 (Chinese Journal of Schistosomiasis Control)

年 卷 期：2021年第33卷第4期

页      码：334-338,395页

摘      要：目的结合重组酶介导核酸等温扩增技术(recombinase-aided isothermal amplification assay,RAA)和核酸试纸条建立一种快速检测日本血吸虫特异性基因片段的方法。方法以日本血吸虫SjG28基因片段作为靶序列,设计并合成引物、荧光探针,建立日本血吸虫核酸试纸条检测方法。通过检测不同拷贝数的含SjG28基因片段的重组质粒和不同浓度的日本血吸虫成虫基因组DNA,对该方法敏感性进行评价;通过检测华支睾吸虫、曼氏血吸虫、十二指肠钩口线虫、埃及血吸虫、巴贝斯虫和卫氏并殖吸虫基因组DNA,对该方法特异性进行评价。结果以重组质粒为模板,建立的日本血吸虫特异性基因片段核酸试纸条检测方法最低检测限为10拷贝/μL;以成虫基因组DNA为模板,最低检测限为1 pg/μL。该方法检测华支睾吸虫、曼氏血吸虫、十二指肠钩口线虫、埃及血吸虫、巴贝斯虫和卫氏并殖吸虫基因组DNA结果均为阴性。结论本研究结合RAA技术和核酸试纸条建立了一种可快速、简便、可视化检测日本血吸虫特异性基因片段的核酸试纸条法。

主 题 词：日本血吸虫 核酸试纸条 重组酶介导的等温扩增 核酸检测 SjG28基因 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16250/j.32.1374.2021016

馆 藏 号：203104860...