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抗菌肽2IQ3及其突变体的原核表达与纯化

抗菌肽2IQ3及其突变体的原核表达与纯化

作     者:马驰 王玉平 谢俊秋 张雪燕 徐攀 杜振亚 倪天治 马如超 韩跃武 Ma Chi;Wang Yu-ping;Xie Jun-qiu;Zhang Xue-yan;Xu Pan;Du Zhen-ya;Ni Tian-zhi;Ma Ru-chao;Han Yue-wu

作者机构:兰州大学医学院基础医学院生物化学与分子生物学研究所甘肃兰州730000 

基  金:甘肃省卫生行业科研管理项目(GWGL2014) 

出 版 物:《兰州大学学报(医学版)》 (Journal of Lanzhou University(Medical Sciences))

年 卷 期:2015年第41卷第3期

页      码:19-22页

摘      要:目的将抗菌肽2IQ3及其突变体基因进行原核表达,经纯化获得目的蛋白。方法根据2IQ3氨基酸序列及大肠杆菌偏爱密码原则设计并合成2IQ3基因编码的核苷酸片段,采用重叠延伸聚合酶链反应法扩增抗菌肽2IQ3及突变体基因,克隆至载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷诱导表达,分析重组蛋白的表达形式,纯化重组蛋白。结果构建的抗菌肽2IQ3及其突变体基因所表达的重组蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,有特异性目的条带出现,纯化的重组蛋白纯度达97%左右,浓度为0.502 mg/m L。结论成功构建了抗菌肽2IQ3及其突变体基因的原核表达体系,并在大肠杆菌中进行表达、纯化,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。

主 题 词:抗菌肽 突变体 大肠杆菌 纯化 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.13885/j.issn.1000-2812.2015.03.004

馆 藏 号:203104897...

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