密码子优化的肺炎支原体P1蛋白在大肠杆菌中的克隆表达

作     者：张奇舒 修冰水 宋晓国 张贺秋 谢宝贵 ZHANG Qi-Shu;XIU Bing-Shui;SONG Xiao-Guo;ZHANG He-Qiu;XIE Bao-Gui

作者机构：福建农林大学菌物研究中心福建福州350002 军事医学科学院基础医学研究所北京100850 

基　　金：国家高技术研究发展计划(2008AA02Z434) 国家重大科技专项(2009ZX10004-718) 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2012年第23卷第3期

页      码：380-382,392页

摘      要：目的：获得密码子优化的肺炎支原体P1黏附蛋白优势表位抗原基因,并在大肠杆菌中表达,为临床诊断试剂和疫苗研制打下基础。方法：采用生物信息学分析肺炎支原体P1蛋白的抗原表位,筛选特异性P1蛋白优势表位区;采用大肠杆菌优势密码子,设计上述P1蛋白优势表位基因序列;采用退火PCR技术合成上述基因,并利用载体pGEX-4T-2实现P1优势表位抗原在大肠杆菌中的表达;采用ELISA法对纯化的P1抗原活性进行测定。结果：肺炎支原体P1蛋白特异性抗原表位主要位于1154~1521 aa,获得的P1优化密码子基因平行突变37个稀有密码子和2个终止密码子;在大肠杆菌中表达的GST-P1融合蛋白的相对分子质量为65.9×103,纯化后重组抗原能与肺炎支原体感染者血清发生特异性的免疫反应。结论：采用密码子优化基因合成技术实现了肺炎支原体P1优势表位抗原在大肠杆菌中的高效表达,为肺炎支原体感染的诊断试剂研究提供了重要参考。

主 题 词：肺炎支原体 P1黏附蛋白 优势密码子 原核表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 1001[医学-基础医学] 08[工学] 09[农学] 100102[100102] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2012.03.016

馆 藏 号：203104951...