三种奶牛常见病菌多重PCR诊断方法的建立

作     者：高瑞娜 张婷 GAO Rui-na;ZHANG Ting

作者机构：朔州职业技术学院生物工程系山西朔州036000 新乡医学院三全学院生命科学技术学院 

出 版 物：《畜牧兽医杂志》 (Journal of Animal Science and Veterinary Medicine)

年 卷 期：2015年第34卷第4期

页      码：15-18,22页

摘      要：根据GenBank公布的布鲁氏菌Bcsp31、牛分枝杆菌pncA、炭疽杆菌capA三种特异基因的保守序列分别设计引物,在引物前添加通用引物(Tag),建立3种奶牛常见病菌的多重实时荧光定量PCR方法;通过构建3种病菌PCR扩增目的基因的质粒用于制备标准品进行敏感性验证;利用大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌用于特异性试验,并对30份样本进行了检测。结果表明,本研究构建的多重实时荧光定量PCR检测时间仅需2h,灵敏度为100个拷贝/uL,与其它细菌无交叉反应,特异性为100%,阳性检出率为88.89%。因此,本试验成功建立了检测3种奶牛常见病菌早期诊断的方法,可以在奶牛养殖中应用。

主 题 词：奶牛 布鲁氏菌 牛分枝杆菌 炭疽杆菌 多重实时荧光定量PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-6704.2015.04.004

馆 藏 号：203104993...