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猪瘟病毒基因芯片检测技术的建立与应用

猪瘟病毒基因芯片检测技术的建立与应用

作     者:姜永厚 商晗武 徐辉 陈伟杰 丁先锋 赵灵燕 JIANG Yong-hou;SHANG Han-wu;XU Hui;CHEN Wei-jie;DING Xian-feng;ZHAO Ling-yan

作者机构:浙江理工大学生命科学学院浙江杭州310018 中国计量学院生命科学学院浙江杭州310018 浙江省畜牧兽医局浙江杭州310020 

基  金:浙江省科技攻关重点项目(2005C22032) 浙江省科技攻关项目(2008C22081) 浙江理工大学科研基金(0616274-Y) 

出 版 物:《浙江农业学报》 (Acta Agriculturae Zhejiangensis)

年 卷 期:2009年第21卷第2期

页      码:85-90页

摘      要:应用寡聚核苷酸基因杂交技术建立一种快速可靠的检测猪瘟病毒的方法。在CSFV病毒保守序列5′非编码区设计了两对特异性引物,在此引物之间设计了特异的核苷酸探针(22—30mer)。通过PCR扩增Cy5标记的DNA片段与固定在玻片表面的探针杂交进行CSFV检测。该技术结合了PCR方法的高度敏感性和DNA-DNA杂交技术的选择特异性。并利用该方法对87例临床样品进行了检测鉴定,结果分析显示,可准确鉴别CSFV病毒,灵敏度与琼脂糖凝胶检测接近,可检测到的质粒最低浓度为0.4pg/μl。结果表明寡核苷酸基因芯片技术可有效地应用于CSFV临床诊断和分子流行病学调查。

主 题 词:猪瘟病毒 基因芯片 寡聚核苷酸探针 检测 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1004-1524.2009.02.002

馆 藏 号:203105049...

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