基于CRISPR/Cas9技术敲除SAMHD1肝癌细胞系的构建及对增殖的影响

作     者：皮思蝶 郑小川 毛彬力 胡源 Pi Sidie;Zheng Xiaochuan;Mao Binli;Hu Yuan

作者机构：重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016 

基　　金：国家自然科学基金项目(81471945) 重庆市科委自然科学基金项目(cstc2018jcyjAX0166) 重庆市教委重庆市青少年创新人才培养雏鹰计划(第七期)共同资助 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2021年第40卷第4期

页      码：1822-1828页

摘      要：运用CRISPR/Cas9基因编辑技术,建立SAMHD1基因敲除的Huh7细胞系,并检测敲除SAMHD1基因后对人肝癌细胞Huh7细胞增殖的影响。针对SAMHD1基因作用的功能区域,设计靶向SAMHD1的小向导sg RNA (Small Guide RNA)。构建lentiCRISPRv2-SAMHD1-g RNA重组质粒转化后测序。筛选稳定敲除SAMHD1的稳定细胞系并测序鉴定。采用克隆形成实验分析基因SAMHD1敲除后肝癌细胞Huh7细胞的增殖能力。测序结果显示lentiCRISPRv2-SAMHD1-g RNA载体构建成功。Western blot结果和测序结果表明成功构建敲除SAMHD1的Huh7稳定细胞系。克隆形成实验结果表明,相对于Huh7-WT细胞,Huh7-KO SAMHD1的细胞增殖能力增强(P<0.01)。成功构建基于CRISPR/Cas9技术敲除SAMHD1基因的Huh7细胞系,SAMHD1的表达缺失促进肝癌细胞的增殖。

主 题 词：SAMHD1 基因敲除 肝癌 细胞增殖 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13417/j.gab.040.001822

馆 藏 号：203105093...