mini-MPN-STE-qPCR法快速定量检测食品中沙门氏菌

作     者：章小洪 陈卫平 王伟影 陈梦 邹小龙 饶琛 郑连宝 ZHANG Xiao-Hong;CHEN Wei-Ping;WANG Wei-Ying;CHEN Meng;ZHOU Xiao-Long;RAO Chen;ZHENG Lian-Bao

作者机构：丽水市质量检验检测研究院丽水323000 德清县食品药品检测中心湖州313200 

基　　金：浙江省市场监督管理局科研计划项目(20190360、20210177) 

出 版 物：《食品安全质量检测学报》 (Journal of Food Safety and Quality)

年 卷 期：2021年第12卷第18期

页      码：7246-7253页

摘      要：目的建立一种快速、简易、可定量检测食源性沙门氏菌定量PCR (quantitative PCR, qPCR)方法。方法依据沙门菌属invA基因序列设计染料法qPCR引物,建立沙门氏菌qPCR检测方法,并通过短时间增菌(short time enrichment, STE)的5管微型多管发酵计数法(mini-most probable number, mini-MPN)进行定量检测,构建mini-MPN-STE-qPCR法。使用人工污染的鸡肉混合液进行定量检测,检测结果与传统MPN计数法和平板计数法进行比较分析。结果建立的qPCR法特异性良好,方法灵敏度为50CFU/mL,结合48孔板min-MPN和4 h短时间增菌,建立的mini-MPN-STE-qPCR法可将整个检测流程缩短至7 h。人工添加沙门氏菌的鸡肉混合液检测结果表明方法检出限为-0.347logMPN/mL,Bland-Altman分析结果显示,此法与传统MPN计数法相关系数r2=0.994,与平板计数法相关系数r2=0.992。结论该方法准确、简单易行、成本低、灵敏度高,可用于食品中沙门菌的快速定量检测。

主 题 词：沙门氏菌 invA基因 荧光定量PCR mini-MPN 短时间增菌 定量检测 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

D　O　I：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2021.18.021

馆 藏 号：203105101...