牛冠状病毒纳米PCR检测方法的建立及初步应用

作     者：孙飞雁 李智杰 魏宇 孙亮 王喜伟 王楠 叶京飞 冯二凯 郭利 SUN Fei-yan;LI Zhi-jie;WEI Yu;SUN Liang;WANG Xi-wei;WANG Nan;YE Jing-fei;FENG Er-kai;GUO Li

作者机构：中国农业科学院特产研究所农业部经济动物疫病重点实验室吉林长春130112 吉林省动物疫病预防控制中心吉林长春130118 柳河县动物疫病预防控制中心吉林柳河135300 

基　　金：吉林省科技发展计划基金项目(20200301016RQ) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2021年第51卷第10期

页      码：1221-1226页

摘      要：为了更加快速地检测牛冠状病毒(BCoV),本试验根据BCoV的具有较高保守性的N基因序列设计1对特异性引物,结合纳米金颗粒材料,通过反应条件和体系优化,建立一种新型的快速灵敏的BCoV检测方法,并应用于临床检测。特异性试验与敏感性试验结果表明,本试验建立的nano-PCR方法对BCoV特异,与牛轮状病毒(BRV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)均无交叉反应。nano-PCR的敏感性是普通PCR的100倍,普通PCR最低核酸检测量为2.24×10^(3)copies/μL,nano-PCR最低核酸检测量为2.24×10^(1)copies/μL。应用所建立的方法对采集的43份腹泻牛的粪拭子、鼻拭子、肺部组织样品进行检测,检出BCoV阳性样品17份,普通PCR检出阳性样品11份,两种方法的符合率为100%。此次建立的nano-PCR在检测牛冠状病毒时具有更高的特异性和敏感性,对临床上的快速诊断及检测具有一定的意义。

主 题 词：牛冠状病毒 nano-PCR 快速诊断 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0180

馆 藏 号：203105174...