应用磁珠法检测并提取尿液游离甲基化DNA

作     者：孙宁 张佳林 周翔宇 张城硕 于瑞 赵博超 SUN Ning;ZHANG Jia-lin;ZHOU Xiang-yu;ZHANG Cheng-shuo;YU Rui;ZHAO Bo-chao

作者机构：中国医科大学附属第一医院肝胆外科暨器官移植科沈阳110001 

基　　金：沈阳市科技计划项目(F13-212-9-00) 

出 版 物：《中国医科大学学报》 (Journal of China Medical University)

年 卷 期：2015年第44卷第10期

页      码：897-900页

摘      要：目的依据血浆中存在游离DNA的理论,采用磁珠作为固相吸附载体并使用特定设计的试剂体系及提取流程,建立一种简便、高效提取尿液样本中游离甲基化DNA的方法,评价其作为用于尿液样本的甲基化基因检测技术的可行性。方法使用磁珠法提取40例成人尿液中游离甲基化DNA,进行甲基化修饰后,紫外分光光度计测定DNA的浓度和纯度。结果结果显示,提取50 m L尿液可得61~200 ng/μL的甲基化DNA,OD260/280为1.8±0.05。使用甲基化阳性对照DNA引物进行PCR及电泳后可见目的条带,说明其纯度可以满足后续甲基化基因检测和PCR等操作要求。结论尿液中确实存在游离甲基化DNA,同时磁珠法提取尿液游离DNA提取过程简单,且提取纯度高,是一种高效的提取方法。

主 题 词：磁珠 甲基化 尿液游离甲基化DNA 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.0258-4646.2015.10.008

馆 藏 号：203105213...