高盐低pH值法优化多花黄精叶绿体DNA提取方法

作     者：王飞凤 吴康靖 杨青文 汪得凯 贾巧君 Wang Feifeng;Wu Kangjing;Yang Qingwen;Wang Dekai;Jia Qiaojun

作者机构：浙江理工大学生命科学与医药学院浙江省植物次生代谢调控重点实验室杭州310018 

基　　金：浙江省重点研发计划项目(2020C02039) 杭州市农业与社会发展科研项目(2019N007) 浙江理工大学基本科研业务费专项资金(2019Q045)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2021年第19卷第19期

页      码：6488-6494页

摘      要：本研究采用高盐低p H值法提取多花黄精叶绿体DNA (cpDNA),并通过L9(33)正交试验,以缓冲液中的Na Cl浓度、叶片用量及去核离心力为考察因素,优化多花黄精cpDNA提取工艺,并设计核基因组及叶绿体基因组特异性引物,验证cpDNA质量。结果表明,当NaCl浓度为1.50 mol/L,叶片用量为10 g,去核离心力为600×g时,以提取的cpDNA为模板,进行PCR扩增,能扩增出叶绿体基因片段且没有扩增出核基因片段,表明提取的cpDNA没有核基因组污染,质量好,产率高,能满足后续基因扩增等实验要求,该条件为本研究的最佳条件。该方法简便快速,对实验仪器要求不高,成本低,能够为黄精属植物cpDNA的提取提供参考。

主 题 词：多花黄精 叶绿体DNA 高盐低pH值法 正交试验 

学科分类：1008[医学-中药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.13271/j.mpb.019.006488

馆 藏 号：203105350...