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采用熔解曲线法进行RHD c.1227G>A基因检测研究

采用熔解曲线法进行RHD c.1227G>A基因检测研究

作     者:马玲 刘太香 薛敏 

作者机构:江苏省血液中心输血研究室江苏南京210042 

基  金:江苏省输血协会英科新创科研基金(JS2018014) 

出 版 物:《南京医科大学学报(自然科学版)》 (Journal of Nanjing Medical University(Natural Sciences))

年 卷 期:2021年第41卷第10期

页      码:1542-1545页

摘      要:目的:建立用于RHD c.1227G>A基因检测的熔解曲线分析方法。方法:根据RHD c.1227G>A基因位点设计并合成序列特异性引物,在荧光定量PCR反应后对产物进行熔解曲线分析,根据熔解曲线峰值的差异进行基因检测结果判断,并与常规序列特异性引物PCR(PCR-sequence specific primer,PCR-SSP)RHD c.1227G>A基因分型方法进行比较;对与血清学结果不一致的标本进行测序分析。结果:在87例血清学初筛为RhD阴性表型的标本中,采用熔解曲线分析法,检测出16例含有RHD c.1227G>A,占比18.4%;与常规PCR-SSP分型结果一致。对1例与血清学吸收放散结果不一致的标本进行RHD exon 9测序分析,证实均为1227A纯合子。熔解曲线分析法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和总符合率均为100%,约登指数为1.0。结论:成功建立用于红细胞RHD c.1227G>A基因分型的熔解曲线分析方法,可以高效、快速地进行RHD c.1227G>A基因检测研究。

主 题 词:熔解曲线 RHD基因 RHD c.1227G>A 

学科分类:1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D O I:10.7655/NYDXBNS20211023

馆 藏 号:203105398...

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