血管内皮细胞生长因子受体短发夹环RNA真核表达载体的构建

作     者：许文林 沈慧玲 袁伟 江云伟 阮长耿 XU Wen-lin,SHEN Hui-ling,YUAN Wei, et al (Jiangsu Institute of Hematology,The First Hospital Affiliated to Suzhou University, Jiangsu Suzhou 215006,China)

作者机构：苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所江苏苏州215006 镇江市第一人民医院江苏镇江212002 

出 版 物：《苏州大学学报（医学版）》 (Suzhou University Journal of Medical Science)

年 卷 期：2004年第24卷第4期

页      码：479-483页

摘      要：目的　构建血管内皮细胞生长因子受体 (VEGFR)Flt 1和KDR特异性短发夹环RNA(ShRNA)真核表达载体。方法　采用人U6SnRNA启动子 ,分别把被 9bp序列间隔的 19bp长短的Flt 1和KDR靶序列的反向重复序列 ,置于 pEGFP C1质粒载体中 ,分别构建成Flt 1和KDR短发夹环RNA ,产生重组质粒 pEGFP C1/U6/Flt 1及pEGFP C1/U6/KDR。分别用Pst和SalⅠ酶切鉴定 ;并将经酶切鉴定后的重组质粒作测序分析。结果　VEGF受体Flt 1和KDR的ShRNA片段被成功克隆进 pEGFP C1质粒中 ,SalⅠ酶切鉴定可切出 4 0 0bp大小的片段 ,DNA测序分析显示 ,重组质粒ShRNA编码序列与设计片断的序列完全一致。结论　针对Flt 1和KDR的特异性ShRNA真核表达载体PEGF/U6/Flt 1及PEGF/U6/KDR的成功构建 。

主 题 词：RNA干扰 Flt-1 KDR 短发夹环RNA U6SnRNA启动子 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 071007[071007] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-0399.2004.04.017

馆 藏 号：203105436...