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羊布鲁氏菌BCSP31、OMP31、L7/L12基因的原核表达载体构建及表达

羊布鲁氏菌BCSP31、OMP31、L7/L12基因的原核表达载体构建及表达

作     者:司瑞 白文涛 张芳琳 刘艳丽 胡刚 吴兴安 阎岩 徐志凯 SI Rui;BAI Wen-tao;ZHANG Fang-lin;LIU Yan-li;HU Gang;WU Xing-an;YAN Yan;XU Zhi-kai

作者机构:第四军医大学微生物学教研室西安710032 

基  金:第四军医大学科研重点项目(05XJZ006) 

出 版 物:《中国人兽共患病杂志》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期:2005年第21卷第11期

页      码:961-964页

摘      要:目的构建羊布鲁氏菌外膜蛋白BCSP31、OMP31和L7/L12基因的重组表达质粒,并在原核系统中表达。方法根据羊布鲁氏菌M5株外膜蛋白BCSP31、OMP31和抗原L7/L12蛋白基因序列设计引物,分别扩增出大小约为1kb、730bp和380bp的目的基因片断,插入pGEM7Zf(+)中测序并进行分析。将3种基因片段亚克隆入pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE及Western-blot进行分析鉴定。结果SDS-PAGE结果表明3个目的蛋白均以融合蛋白的方式成功表达,在相对分子量57kDa、49kDa、38kDa处有表达条带,经薄层扫描分析,目的蛋白分别占全菌蛋白的42%、36%、40%。Western-blot证实3种融合蛋白均能被布鲁氏菌免疫兔血清识别。结论成功构建了3种蛋白的表达载体并进行了高效表达,3种蛋白均具有良好的免疫原性。

主 题 词:羊布鲁氏菌 BCSP31蛋白 OMP31蛋白 L7/L12蛋白 基因表达 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1002-2694.2005.11.008

馆 藏 号:203105487...

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