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忽地笑二级侧脉凸起突变体相关基因表达差异分析与克隆

忽地笑二级侧脉凸起突变体相关基因表达差异分析与克隆

作     者:高磊 郭素敏 崔永兰 诸葛强 黄敏仁 GAO Lei;GUO Su-Min;CUI Yong-Lan;ZHUGE Qiang;HUANG Min-Ren

作者机构:南京林业大学林木遗传和基因工程重点实验室 

基  金:科技部"863"项目(编号:2002AA241051) 

出 版 物:《遗传》 (Hereditas(Beijing))

年 卷 期:2007年第29卷第4期

页      码:490-498页

摘      要:忽地笑Raised Secondary Lateral Veins(RSLV)突变体平行脉间横向二级侧脉显著凸起,生长不良,雄蕊完全退化。本研究利用表达型噬菌体载体ZAP构建了野生型和突变体忽地笑叶片cDNA文库,分别随机挑取cDNA克隆进行5′端测序,共得到3,122条有效ESTs。利用这些ESTs序列,选择非冗余基因,设计512条70mer的特异性序列为寡核苷酸探针,制作芯片,对忽地笑野生型和突变体叶器官进行基因表达谱分析。进一步采用实时定量PCR技术验证芯片实验结果,最终确定所检测的基因中,有5个基因在突变型和野生型间表达差异显著,分别是韧皮部蛋白2(phloem protein2,PP2)、铁蛋白(ferritin)、果胶甲酯酶(pectin methyl esterases,PMEs),以及叶绿素a/b结合蛋白和丙酮酸脱羧酶等。克隆获得了其全长cDNA,并探讨了这些差异基因与忽地笑突变型形成的可能关系。

主 题 词:忽地笑 RSLV突变型 基因芯片 叶发育 

学科分类:090706[090706] 0907[农学-草药学] 09[农学] 

核心收录:

D O I:10.1360/yc-007-0490

馆 藏 号:203105535...

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