实时定量PCR检测siRNA对小鼠巨噬细胞中FTH1基因表达的抑制作用

作     者：杜军伟 王远志 陈创夫 葛阳春 唐利燕 DU Jun-wei;WANG Yuan-zhi;CHEN Chuang-fu;GE Yang-chun;TANG Li-yan

作者机构：石河子大学动物科技学院石河子832003 新疆民族与地方高发病教育部重点实验室石河子832003 

基　　金：国家自然科学基金(30800813) 兵团博士基金(2009JC15) 高层次人才科研启动资金专项(RCZX200828) 973项目(2010CB530200)联合资助 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2010年第26卷第7期

页      码：638-641页

摘      要：目的通过实时定量PCR(real-ti me PCR)检测基因表达的mRNA,建立一种直接观察小干扰RNA(si RNA)抑制目的基因表达的方法。方法化学设计合成对应于FTH1(ferritin heavy chain1,FTH1)基因表达mRNA的si RNA,经TurboFectTMin vitro Transfection Reagent转染小鼠RAW264.7巨噬细胞,48h后,提取总RNA,逆转录为cDNA。以3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)为内参,定量检测FTH1的表达,比较干扰前后FTH1基因mRNA的量。结果 3种si RNA处理的小鼠巨噬细胞中FTH1基因的表达抑制率最高为97.60%。结论实时定量PCR方法的建立为研究布鲁氏菌在侵染巨噬细胞过程中FTH1的功能提供了有效途径。

主 题 词：实时定量PCR siRNA 小鼠RAW264.7巨噬细胞 FTH1 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2010.07.006

馆 藏 号：203105654...