河北省致犊牛腹泻主要病原多重PCR检测方法的建立

作     者：高亚桃 李妍 刘立元 王猛 郭姚蕊 刘胜丽 马亚宾 蒋桂娥 刘志勇 秦建华 赵月兰 GAO Yatao;LI Yan;LIU Liyuan;WANG Meng;GUO Yaorui;LIU Shengli;MA Yabin;JIANG Guie;LIU Zhiyong;QIN Jianhua;ZHAO Yuelan

作者机构：河北农业大学动物医学院河北保定071001 河北省畜牧良种工作站河北石家庄050061 河北省唐山市动物疫病防控中心河北唐山064001 

基　　金：河北省重点研发计划项目奶牛场犊牛多病原感染性腹泻综合防治技术研究资助项目(20326603D) 河北省现代农业产业技术体系奶牛创新团队建设项目奶牛疫病防控资助项目(HBCT2018120205) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2021年第41卷第10期

页      码：1930-1936页

摘      要：为建立一种能同时检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛轮状病毒(BRV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的多重PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的BVDV的5′-UTR序列、BRV的VP6基因和IBRV的gB基因设计3对特异性引物,通过对反应条件的优化,建立了一种多重PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法对牛冠状病毒(BCoV)、牛细小病毒(BPV)、牛隐孢子虫没有交叉反应,特异性较好;灵敏性试验结果显示,该方法对BVDV、BRV和IBRV的最低检出限分别为1.44×10^(5),1.38×10^(5),1.2×10^(5)copies/μL。利用该方法对从河北省部分地区采集的50份犊牛腹泻粪便样品进行检测,结果显示,BVDV和BRV混合感染检出率为18%(9/50),BVDV和IBRV混合感染检测率为14%(7/50),BRV和IBRV混合感染检测率为22%(11/50),3种病毒混合感染率为4%(2/50)。多重PCR检测和单一PCR检测方法均能检出被检样品中的病原,两种方法的总符合率分别为BVDV 90%、BRV 84%和IBRV 88%。该方法比单一PCR检测方法检测阳性率高,优于单一PCR检测方法,表明该方法可应用于临床检测。本研究建立的多重PCR检测方法,能快速、有效、准确地检测出BVDV、BRV和IBRV 3种病毒,对于流行病学调查及疾病的诊断等具有重要意义。

主 题 词：牛病毒性腹泻病毒 牛轮状病毒 牛传染性鼻气管炎病毒 多重PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.10.07

馆 藏 号：203105780...