猪圆环病毒3型Cap蛋白的原核表达

作     者：王帅勇 汪琪 朱世强 姚云 虞凌雪 刘晓敏 单同领 郑浩 周艳君 童武 李国新 高飞 童光志 于海 WANG Shuaiyong;WANG Qi;ZHU Shiqiang;YAO Yun;YU Lingxue;LIU Xiaomin;SHAN Tongling;ZHENG Hao;ZHOU Yanjun;TONG Wu;LI Guoxin;GAO Fei;TONG Guangzhi;YU Hai

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 

基　　金：上海市自然科学基金青年项目(16ZR1444000) 中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(2019JB05) 中国农业科学院创新工程“猪病毒性繁殖障碍综合症团队”项目 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2021年第29卷第5期

页      码：59-63页

摘      要：为获得具有良好抗原性的猪圆环病毒3型(PCV3)Cap重组蛋白,根据本实验室已测序获得的1株全基因组序列设计特异性引物,以阳性病料中提取的病毒DNA基因组为模板,通过PCR方法扩增得到PCV3的去核定位信号的Cap蛋白基因,将目的片段插入到pCold TF载体中构建pCold TF-dPCV3-Cap重组质粒,然后将其转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,通过优化表达和纯化条件,最终获得纯度较高的Cap重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,该蛋白能够在上清液中大量表达,并且在IPTG终浓度为1 mmol/mL、16℃诱导20 h的条件下表达量最高;Western blot结果证实通过磁珠纯化后的目的蛋白与PCV3阳性血清能够发生特异性反应。因此,重组Cap蛋白具有良好的反应原性和特异性,可以作为研制PCV3多表位基因工程疫苗和血清抗体诊断方法的候选靶抗原。

主 题 词：猪圆环病毒3型 原核表达 Cap蛋白 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2021.05.001

馆 藏 号：203105789...