定量多重PCR-高效液相色谱分析错配修复基因大片段缺失

作     者：王亚平 朱明 孙孟红 李金田 张军妮 张晓梅 刘晓蓉 

作者机构：江苏省肿瘤防治研究所分子生物学研究室南京210009 上海市肿瘤医院分子病理学研究室 

基　　金：江苏省卫生厅重大研究项目基金(H9805 H200207) 江苏省卫生厅重点人才基金(RC2002070)~~ 

出 版 物：《中华医学遗传学杂志》 (Chinese Journal of Medical Genetics)

年 卷 期：2003年第20卷第6期

页      码：517-521页

摘      要：目的　建立一种以多重 PCR-高效液相色谱 (high performance liquid chromatography,HPL C)分析为基础的错配修复基因 DNA大片段缺失检测技术。　方法　设计合成 35对引物 ,分 8个多重PCR反应扩增 MSH2和 ML H1基因的 35个外显子 ,PCR产物经高效液相色谱半定量分析 ,确定各外显子拷贝数。 (1)双盲法分析阴性和阳性对照样本 ,完成方法学可靠性检验。 (2 )分析 14例遗传性非息肉性大肠癌患者外周血细胞 DNA和 13例散发性大肠癌患者癌组织细胞 DNA样本 ,筛查 MSH2和 ML H1基因DNA大片段缺失。　结果　 (1)稳定检出阳性对照样本的 DNA大片段缺失 ;(2 )在筛查样本检出 2例新的MSH2基因 DNA大片段缺失 ,分别为 MSH2基因外显子 7遗传性缺失和 MSH2基因外显子 1～ 6体细胞性缺失。　结论　多重 PCR- HPL C分析系统可以作为突变基因分析系统的一个重要补充 ,在基因 DNA大片段缺失检测中发挥作用。

主 题 词：高效液相色谱 基因错配 基因修复 基因大片段缺失 多重聚合酶链反应 大肠癌 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j.issn:1003-9406.2003.06.013

馆 藏 号：203105863...