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猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立

猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立

作     者:朱军莉 余旭平 时晗 吴海波 金俊杰 何世成 

作者机构:浙江大学动物科学学院浙江杭州310029 东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 

基  金:浙江省"十五"重大招标资助项目 (J30 32 0 ) 

出 版 物:《中国兽医科技》 (Chinese Journal of Veterinary Science and Technology)

年 卷 期:2004年第34卷第2期

页      码:38-42页

摘      要:根据已发表的PCV 1和PCV 2全基因组序列 ,设计了 3条引物 ,组成PCV 2的特有引物对和PCV 1、PCV 2的共有引物对 ,分别扩增长度为 4 72bp和 339bp的片段。为验证PCR扩增的特异性 ,将 4 72bp的扩增产物纯化后 ,克隆到 pMD 18 T载体 ,转化大肠埃希氏菌TG1,对阳性克隆进行酶切及PCR鉴定 ,并测序。将该序列递交NCBI进行BLAST同源序列比较 ,发现它与美国、加拿大及我国台湾的PCV 2毒株核苷酸序列的同源性均在 99%以上 ,与PCV 1毒株的同源性为 86 %。结果显示 ,该方法最少可用于 3μg病料组织和 0 .75 pgDNA的PCV 2检出 ,具有很高的灵敏性。应用该PCR方法检测了浙江省和上海市 4 7份“猪高热综合征”病料 ,PCV 2感染阳性率为 36 .17% ,PCV 1单独感染阳性率为 34.0 4 %。

主 题 词:猪圆环病毒 复合PCR检测方法 多系统衰竭综合征 同源序列 

学科分类:090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1673-4696.2004.02.008

馆 藏 号:203105974...

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