转基因大豆‘ZH 10-6’数字PCR精准定量检测方法的建立

作     者：刘双 赵新 李瑞环 刘娜 兰青阔 檀建新 王永 LIU Shuang;ZHAO Xin;LI Ruihuan;LIU Na;LAN Qingkuo;TAN Jianxin;WANG Yong

作者机构：天津市农业科学院生物技术研究所天津300381 河北农业大学食品科技学院河北保定071001 

基　　金：转基因重大专项(2019ZX08013-002 2019ZX08004001) 

出 版 物：《中国农业大学学报》 (Journal of China Agricultural University)

年 卷 期：2021年第26卷第11期

页      码：49-58页

摘      要：为实现转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’转化体成分的精准定量检测,以转基因大豆‘ZH 10-6’的5′端边界序列为靶序列,设计PCR扩增引物和TaqMan探针,并对引物探针浓度进行优化,经特异性测试,建立了耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’的微滴式数字PCR检测方法。结果表明:1)特异性良好:只有以转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’基因组为模板才有扩增信号;2)灵敏度高:在相对标准偏差≤25%的情况下,方法的检出限(LOD)为13.0个拷贝;定量限(LOQ)为66.0个拷贝;3)PCR扩增反应模板含量与样品拷贝数之间线性相关系数R^(2)>0.99,DNA含量线性范围为0.08%~100.00%。综上,本研究建立的转基因耐除草剂大豆‘ZH 10-6’转化体定量方法特异性强、稳定性好、准确度和灵敏度高,可用于对转基因大豆品种‘ZH 10-6’的定量检测。

主 题 词：微滴式数字PCR 转基因耐除草剂大豆‘ZH 10-6’ 精准定量 转化体特异性 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100403[100403] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.11841/j.issn.1007-4333.2021.11.05

馆 藏 号：203106071...