梯型熔解温度等温扩增检测食品中植物源成分的内标方法构建

作     者：王德国 张萌 王永真 张永清 孙军涛 郭孝辉 肖付刚 WANG De-Guo;ZHANG Meng;WANG Yong-Zhen;ZHANG Yong-Qing;SUN Jun-Tao;GUO Xiao-Hui;XIAO Fu-Gang

作者机构：许昌学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室许昌461000 河南科技大学食品与生物工程学院洛阳471000 

基　　金：河南省科技计划项目(182102110285 202102310468) 

出 版 物：《食品安全质量检测学报》 (Journal of Food Safety and Quality)

年 卷 期：2021年第12卷第21期

页      码：8439-8445页

摘      要：目的为梯型熔解温度核酸等温扩增(ladder-type melting temperature isothermal amplification,LMTIA)检测食品中植物源特异性基因建立内标方法,并用于检测肉制品中植物成分。方法针对植物转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)的共有序列,设计LMTIA引物,优化反应温度,考查方法灵敏度,并评估淀粉制品、蜂蜜、食用油DNA提取方法与LMTIA检测方法的适应性,以H_(2)O、鸭肉、鸡肉、羊肉、猪肉和牛肉基因组为阴性对照测试LMTIA方法的假阳性。结果所建立的LMTIA方法在最优温度57℃时,灵敏度为10 pg/μL玉米基因组与10 pg/μL红枣基因组,可检出肉制品掺入0.1%的玉米淀粉,所选淀粉制品、蜂蜜、食用油DNA提取方法均适用于LMTIA检测,并且所有阴性对照样品在测试中均未出现假阳性。结论本研究成功建立了LMTIA检测食品中植物源特异性基因的内标方法,排除了DNA提取引起的LMTIA检测的假阴性,可用于肉制品中植物成分定性检测。

主 题 词：梯型熔解温度等温扩增 植物源成分 特异性基因 内标方法 DNA提取方法 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

D　O　I：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2021.21.019

馆 藏 号：203106303...