肝片吸虫天冬酰胺内肽酶的分子特征、遗传进化及抗原特性研究

作     者：张国武 孟庆玲 乔军 王熙凤 张凯 宁程程 季春辉 才学鹏 ZHANG Guo-wu;MENG Qing-ling;QIAO Jun;WANG Xi-feng;ZHANG Kai;NING Cheng-cheng;JI Chun-hui;CAI Xue-peng

作者机构：石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046 

基　　金：新疆自治区研究生科研创新计划(XJ2020G085) 国家重点研发计划(2017YFD0501200) 

出 版 物：《西南农业学报》 (Southwest China Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2021年第34卷第10期

页      码：2289-2294页

摘      要：【目的】分析肝片吸虫Legumain蛋白的分子特征、遗传进化及抗原性,评估其作为诊断抗原的潜力。【方法】根据GenBank中已发表的肝片吸虫(Fh)Legumain基因序列设计特异性引物,以Fh总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,并将扩增产物克隆到pMD19-T载体中测序,分析其分子特征。将Legumain基因克隆入表达载体pET-32a(+)中,将其转化至Escherichia coli感受态细胞Transetta(DE3)中,IPTG诱导表达并获得纯化的重组蛋白Legumain,进行抗原性分析。【结果】Fh Legumain基因cDNA全长1278 bp,编码425个氨基酸,编码蛋白分子的优势抗原表位主要集中在第73~103、115~137、254~308、319~337、360~375位;1~21位有信号肽,无跨膜区,为亲水性蛋白。【结论】经SDS-PAGE检测,重组Legumain蛋白分子量约为65 kDa,与预期大小相符;Western blot分析表明,重组Legumain可被感染肝片吸虫的绵羊阳性血清特异性识别,证明具有良好的反应原性。小鼠免疫试验证实该蛋白具有良好的免疫原性。

主 题 词：肝片吸虫 天冬酰胺内肽酶 分子特征 原核表达 抗原性 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16213/j.cnki.scjas.2021.10.030

馆 藏 号：203106457...