弓形虫SAG1基因功能片段的克隆、表达与抗原性分析

作     者：张建伟 王海龙 殷国荣 刘转转 刘晋平 赵丰 ZHANG Jian-wei;WANG Hai-long;YIN Guo-rong;LIU Zhuan-zhuan;LIU Jin-ping;ZHAO Feng

作者机构：山西医科大学医学寄生虫学研究所寄生虫学教研室太原030001 山西农业大学动物科技学院 山西医科大学第一临床医学院 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30640057) 

出 版 物：《山西医科大学学报》 (Journal of Shanxi Medical University)

年 卷 期：2009年第40卷第6期

页      码：481-484页

摘      要：目的重组、表达与纯化弓形虫速殖子主要表面抗原1(SAG1)具有生物活性的功能多肽,分析其抗原性。方法根据SAG1的基因序列设计引物,截除其前端的信号肽和后端的疏水区,只扩增650bp的功能区域;将该片段重组入带有His标签的pET-30a(+)质粒,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其在***中表达,调整诱导表达时间、IPTG浓度等条件,高效稳定地表达出目的蛋白;镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,Western-blot检验纯化后蛋白的抗原性。结果成功构建pET-30a(+)/SAG1重组质粒,使其在***中高效稳定地可溶性表达,并确定出在0.5mmol/LIPTG浓度下诱导12h为最佳表达条件,Western-blot显示纯化后的蛋白具有良好的抗原性。结论获得了可溶性的弓形虫SAG1基因功能片段表达的产物,其具有良好的抗原性。

主 题 词：弓形虫 SAG1 原核表达 蛋白纯化 抗原性 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-6611.2009.06.001

馆 藏 号：203106489...