重组大肠杆菌BL21-pET28a(+)-ADH诱导表达羰基还原酶的条件优化与应用

作     者：李莉 张芳 罗晨 阚静 王旻 

作者机构：中国药科大学生命科学与技术学院南京210009 南京中医药大学药学院生物制药教研室南京210046 

出 版 物：《药学与临床研究》 (Pharmaceutical and Clinical Research)

年 卷 期：2010年第18卷第2期

页      码：160-163页

摘      要：目的:对重组大肠杆菌*** BL21-pET28a(+)-ADH表达羰基还原酶的条件进行优化,以增加目的蛋白的表达量,提高生物合成(S)-3,5-双三氟甲基苯乙醇的转化率。方法:将重组质粒pET28a(+)-ADH转化*** BL21后,对诱导过程产生影响的4个因素,诱导时间、诱导温度、诱导剂浓度及摇菌转数,利用SPSS统计学软件进行正交实验设计,并对实验结果进行直观分析及方差分析,对实验得出的最佳搭配诱导条件进行验证。结果:直观分析中诱导温度的R值最大,其次为摇菌转数和诱导剂IPTG浓度,诱导时间的R值最小;方差分析表明诱导温度的P值小于0.05,而摇菌转数、IPTG浓度及时间因素的P值均大于0.05。利用优化后的菌种生物合成(S)-3,5-双三氟甲基苯乙醇,转化率达到95.16%。结论:本实验的最优诱导条件为,诱导温度25℃、诱导摇菌转数***-1、诱导剂IPTG浓度0.5mmol.L-1、诱导时间6h。且重组菌对于(S)-3,5-双三氟甲基苯乙醇的转化率达到95.16%。

主 题 词：羰基还原酶 条件优化 正交试验 直观分析 方差分析 生物转化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-7806.2010.02.017

馆 藏 号：203106555...