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多房棘球绦虫TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

多房棘球绦虫TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作     者:王冰洁 赵莉 班万里 段兰利 郭璐 陈云英 余婉蓉 张壮志 WANG Bingjie;ZHAO Li;BAN Wanli;DUAN Lanli;GUO Lu;CHEN Yunying;YU Wanrong;ZHANG Zhuangzhi

作者机构:新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心新疆乌鲁木齐830013 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 

基  金:国家自然科学基金资助项目(31560692) 

出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期:2021年第41卷第12期

页      码:2421-2425页

摘      要:为建立高效、特异的多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis,E.m)检测方法,本研究设计了1组基于E.m线粒体NADH脱氢酶亚基3(NADH3)基因的特异性引物和TaqMan探针,通过对反应体系及条件进行优化,建立了E.m荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法线性关系好,灵敏度高,在10;~10;拷贝/μL相关系数达0.998,灵敏度达10拷贝/μL;在特异性试验中,与其他病原虫株无交叉反应,特异性较好;重复性试验(组间和组内)的变异系数均小于3%。应用建立的方法对采集的50份临床样品进行检测,发现9份为E.m感染阳性。由此可见,建立的荧光定量PCR方法可用于泡型包虫病(alveolar echinococcosis,AE)的快速检测、定量分析及流行病学调查。

主 题 词:多房棘球绦虫 TaqMan探针 实时荧光定量PCR 

学科分类:090603[090603] 1002[医学-临床医学类] 09[农学] 0906[农学-水产类] 100201[100201] 10[医学] 

D O I:10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.12.19

馆 藏 号:203106948...

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