发酵乳杆菌来源4,6-α-葡萄糖基转移酶的酶学表征及产物性质鉴定

作     者：盛露菲 杨卫康 吴敬 陈晟 Lufei Sheng;Weikang Yang;Jing Wu;Sheng Chen

作者机构：江南大学食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 

基　　金：国家自然科学基金(No.31972032)资助 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2021年第37卷第12期

页      码：4363-4372页

摘      要：4,6-α-葡萄糖基转移酶(4,6-α-GTs)能以直链淀粉为底物合成含α(1-6)键的α-葡聚糖,在酶法合成膳食纤维中具有很大的应用潜力。根据4,6-α-GTs氨基酸序列中的保守区段设计引物,从发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum基因组中PCR扩增得到一条假定GTFB-like 4,6-α-GTs基因(命名为gtf16),构建重组质粒pET15b-gtf16并在宿主大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)成功表达,纯化后对其进行酶学表征。结果表明,该酶最适pH为5.0,最适温度为40℃。通过薄层色谱、NMR光谱、水解酶水解等检测手段对Gtf16酶转化产物进行系统的表征,发现其产物具有以下特征:与已报道的来源于罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri121菌株的4,6-α-葡萄糖基转移酶-GtfB与直链淀粉作用后的产物异麦芽寡糖结构类似;产物键型中α(1-6)键占比可达75%,产物平均分子量为23 793 Da;产物被消化酶水解后得到的抗消化成分含量可达88.22%。

主 题 词：4,6-α-葡萄糖基转移酶 克隆表达 酶学性质 异麦芽寡糖 

学科分类：0832[0832] 08[工学] 083201[083201] 

核心收录：

D　O　I：10.13345/j.cjb.200788

馆 藏 号：203106958...