实时荧光跨越式滚环等温扩增结合PMA检测虾产品中的活副溶血性弧菌

作     者：董晶 徐慧 郭威 卢鑫 张伟 DONG Jing;XU Hui;GUO Wei;LU Xin;ZHANG Wei

作者机构：河北农业大学食品科技学院河北保定071000 河北农业大学理工学院河北沧州061100 河北农业大学生命科学学院河北保定071000 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(31371772) 河北省自然科学基金重点项目(C2019204342) 河北省重点研究开发计划项目(18275501D) 中央引导地方科技发展资金项目-基础研究项目(216Z5501G) 河北农业大学食品加工学科群经费资助项目(2021-06) 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2021年第42卷第24期

页      码：289-295页

摘      要：目的:为快速检测虾产品中的活副溶血性弧菌,建立一种实时荧光跨越式滚环等温扩增(real-time fluorescent saltatory rolling circle amplification,RF-SRCA)与叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)染料相结合的检测方法。方法:依据副溶血性弧菌的特异性基因toxR设计并筛选引物,对PMA-RF-SRCA检测方法进行特异性、灵敏度及检出限分析,并与PMA-实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法进行对比。对76份样品进行检测,以GB 4789.7—2013方法为标准,对PMA-RF-SRCA方法的相对敏感性、相对特异性、相对符合率进行计算,以对本方法的实用性进行评估。结果:此方法的引物特异性良好,12株副溶血性弧菌结果均呈阳性,18株非副溶血性弧菌结果均呈阴性;PMA-RF-SRCA法灵敏度为3.2×10^(0) CFU/mL,检出限为2.08×10^(1) CFU/g,此方法的灵敏度是PMA-real-time PCR的100倍。经过实际样品检测,PMA-RF-SRCA方法的敏感性、特异性、符合率分别为100.00%、96.00%和98.68%。结论:PMA-RF-SRCA方法特异性强、灵敏度高,可用于虾产品中的活副溶血性弧菌的检测与筛查。

主 题 词：实时荧光跨越式滚环等温扩增 叠氮溴化丙锭 副溶血性弧菌 toxR基因 食品 检测 

学科分类：0832[0832] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 08[工学] 083201[083201] 

核心收录：

D　O　I：10.7506/spkx1002-6630-20200927-329

馆 藏 号：203106982...