基于逆转录重组酶聚合酶扩增技术的苹果病毒新型快速检测方法

作     者：焦健 夏炎 武雪莉 王苗苗 宋春晖 庞宏光 白团辉 宋尚伟 黄松 郑先波 JIAO Jian;XIA Yan;WU Xueli;WANG Miaomiao;SONG Chunhui;PANG Hongguang;BAI Tuanhui;SONG Shangwei;HUANG Song;ZHENG Xianbo

作者机构：河南农业大学园艺学院河南郑州450002 信阳农林学院河南信阳464006 

基　　金：国家自然科学基金项目项目(31801818) 河南省现代农业产业体系项目(S2014-11-G02,Z2014-11-03) 河南省高等学校科技创新团队项目(19IRTSTHN009) 河南省科技攻关项目(202102110188) 

出 版 物：《河南农业大学学报》 (Journal of Henan Agricultural University)

年 卷 期：2021年第55卷第6期

页      码：1097-1103页

摘      要：利用逆转录重组酶聚合酶扩增技术(Reverse transcription-recombinase polymerase amplification,RT-RPA),为苹果病毒的快速检测提供技术支持。以苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)、苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus,ASPV)、苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)和苹果坏死花叶病毒(apple necrotic mosaic virus,ApNMV)为检测对象,通过特异性RPA引物设计以及反应条件优化,对检测方法的灵敏度、特异性进行评价,并与传统RT-PCR方法进行比较。结果表明,所设计的RPA引物特异性高,反应温度为37℃,反应时间为20 min,RT-RPA对4种苹果病毒的检测灵敏度为9.63×10^(1) copies,是普通RT-PCR的10^(2)~10^(3)倍。所建立的RT-RPA检测方法具有等温反应、检测速度快、灵敏度高等优点,可以用于快速检测苹果病毒病。

主 题 词：逆转录重组酶聚合酶扩增 苹果病毒病 快速检测 等温扩增 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

D　O　I：10.16445/j.cnki.1000-2340.20210823.001

馆 藏 号：203107096...