基于牛支原体TU基因的Taqman探针实时荧光定量PCR方法的建立

作     者：成虹松 袁海文 岳筠 谢晓东 程振涛 文明 李涛 CHENG Hong-song;YUAN Hai-wen;YUE Jun;XIE Xiao-dong;CHENG Zhen-tao;WEN Ming;LI Tao

作者机构：贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室贵州贵阳550025 贵州省动物疫病预防控制中心贵州贵阳550008 

基　　金：贵州省科学技术基金项目(黔科合J字2082号) 贵州省科学技术项目(黔科合基础1181号) 贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑一般161) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2022年第52卷第1期

页      码：33-40页

摘      要：本研究旨在建立牛支原体Taqman探针实时荧光定量PCR方法,便于临床上快速检测、诊断牛支原体病。本研究根据牛支原体TU基因(登录号:CP002188.1)设计合成特异性引物及Taqman探针,并通过试验检验所建立的检测方法的特异性和灵敏性。本研究建立的实时荧光定量PCR方法标准曲线的截距为46.20,斜率为-3.24,相关系数为-0.996,提示标准品的浓度与Ct值呈线性关系。方法性能评价显示,所建方法的组内及组间重复性变异系数均低于0.02,说明所建方法的重复性好;灵敏性试验中,目的基因最小检出浓度为19.1 copies/μL,敏感性是常规PCR(1.91×10^(4)copies/μL)的1 000倍。试验结果表明,本研究建立的牛支原体荧光定量PCR方法,具有精确、敏感、特异等优点,可为临床上快速检测牛支原体病提供技术支撑。

主 题 词：牛支原体 TU基因 Taqman探针 荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0004

馆 藏 号：203107147...