检测牛5种腹泻病毒的多重RT-PCR方法的建立及应用

作     者：孙吉 岳华 汤承 SUN Ji;YUE Hua;TANG Cheng

作者机构：西南民族大学畜牧兽医学院成都610041 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室成都610041 

基　　金：国家农业产业技术体系四川肉牛创新团队专项(SCCXTD-2020-13) 西南民族大学新发动物疫病研究创新团队(2020NTD02) 西南民族大学动物医学实验室平台建设项目(2020PTJS29) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2022年第53卷第1期

页      码：209-218页

摘      要：牛A群轮状病毒(BRVA)、牛冠状病毒(BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛诺瓦病毒(BNoV)和牛纽布病毒(BNeV)是引起犊牛腹泻的常见病毒,且临床上多存在混合感染的情况。本试验的目的是建立可以同时检测上述5种病毒的多重PCR方法。通过设计引物,优化反应体系和条件,成功建立了可同时检测BRVA、BCoV、BVDV、BNoV和BNeV的多重PCR方法。该方法只特异性检出目标病毒,而对牛星状病毒、牛嵴病毒、牛细小病毒、产肠毒素大肠杆菌、沙门菌和空肠弯曲杆菌等腹泻病原均无扩增,具有良好的特异性和稳定性。对BRVA、BCoV、BVDV、BNoV、BNeV的最低检测下限分别为1.63×10^(5)、2.0×10^(6)、1.9×10^(5)、1.96×10^(5)和2.0×10^(5)copies·μL^(-1)。比较试验表明,该多重RT-PCR方法与检测单一病毒的RT-PCR方法的符合率为100%。利用该方法对2019—2020年采集自川西北草原的220份牦牛腹泻样本的检测结果表明,BRV的检出率为40.5%、BNoV的检出率为5.9%、BNeV的检出率为4.5%,而BVDV和BCoV无检出。本研究建立的多重RT-PCR方法可同时检测犊牛腹泻粪便样品中的5种常见腹泻病毒,为牛腹泻的快速诊断提供了技术支持。

主 题 词：牛A群轮状病毒 牛冠状病毒 牛病毒性腹泻病毒 牛诺瓦病毒 牛纽布病毒 多重RT-PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.11843/j.issn.0366-6964.2022.01.021

馆 藏 号：203107182...